如何用液氮罐安全冷冻保存呢？

　　细胞冻存是细胞生存的条件之一，细胞冻存都是采用的低温液氮罐保温特性，目的就是我们的细胞离开生长环境依然可正常生存，使用我们的液氮罐储存细胞可以避免细胞污染现象，起到保护细胞的作用。

　　方法：

　　仪器采用液氮罐、冻存管、离心管、吸管等

　　试剂：0.25％胰酶、造就基

　　冻存液的配置：添加甘油或者DSMO，浓度达到20％，配好冻存液以后在4摄氏度才可以生存。

　　一：将消化细胞悬液至离心管内。

　　二：1000rpm离心10分钟，弃上清液。

　　三：沉淀的情况下可以添加掩护液，然后将悬浮液分至冻存管内，每管控制在1ml左右，然后密封起来，一定要密封严，否则会造成爆炸现象。

　　四：贴上标签，表明细胞名称及日期。

　　五：温度流程：室温→4℃（20分钟）→冰箱冷冻室（30分钟）→低温冰箱（-30℃1小时）→气态氮（30分钟）→液氮。

　　提醒大家操纵液氮时应该避免出现冻伤现象，一定要观察液氮量，量少的话，随时注意增补液氮量，不然的话会影响标本的活性，一般30立方的液氮可以用1.5月，所以我们需要多留心些就好。